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首页 /应用宝典 /ELISA抗体应用指南 /Troubleshooting
问题
可能的原因
解决方法
阴性对照产生了阳性的结果
试剂或者耗材污染
更换试剂,使用一次性耗材
洗板出现问题
更换更强配方的洗涤液,增加洗板次数,延长洗板时间
如果是在双抗体夹心法中出现,有可能是包被抗体与二抗间有交叉反应
更换包被抗体或二抗
使用了过多的抗体
减少抗体使用量
整板出现高背景
二抗产生了非特异性吸附
减少二抗使用量,缩短二抗反应时间
显色液不新鲜
使用现配的显色液
显色反应时间过长没有终止
控制显色反应时间,及时终止反应
反应温度过高导致的非特异性吸附
严格控制反应在最适温度下进行
封闭条件不佳导致的非特异性吸附
更换封闭能力更强的封闭液,延长封闭时间
反应信号偏低
包被条件不合适
提高包板浓度,延长包板时间
抗原抗体反应不够充分
延长反应时间,确保反应在最适温度下进行
显色液配方不恰当
增加显色底物的量
二抗结合不够
提高二抗浓度,延长反应时间,更换效果更好的二抗
梯度稀释做ELISA时产生跳孔现象
酶标板叠放导致传热不均匀,各孔反应温度有差异
尽量避免酶标板叠放在一起
移液器稀释时未能保持连续性
定期校准移液器,确保移液器的正确使用
反应溶液蒸发
酶标板用封条密封或者加盖
洗板不均匀
确定洗板机能够正常工作
酶标板底有杂物或者水珠
读板时清理干净酶标板底部
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