Note: Application as IHC, only suitable for histochemical staining or fluorescence staining of paraffin-embedded sections. Application as ICC/IF, suitable for histochemical or fluorescent staining of frozen sections, as well as chemical and fluorescent staining at the cellular level.
注意:抗体应用为IHC的,抗体只适合于石蜡切片的组化染色或者荧光染色。
抗体应用为IF/ICC的,抗体适合于冰冻切片的组化染色或者荧光染色,以及细胞水平的化学染色和荧光染色。
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本产品为SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒(SDS-PAGE Gel Rapid Preparation Kit),试剂盒组分包括凝胶液、缓冲液和促凝剂等,可以简单快速地制备SDS-PAGE凝胶(即为SDS聚丙烯酰胺凝胶)。促凝剂为改良配制,无毒,环保。
使用便捷 ---- 制胶液预混为凝胶液与缓冲液,简单配制加入促凝剂就可以完成制胶。
彩色指示 ---- 浓缩胶彩色染色,上样孔清晰,彩色不迁移,不干扰蛋白质的正常电泳、染色、转膜等。
改良促凝 ---- 促凝剂改良配制,无毒环保。
节省时间 ---- 配分离胶后,无需等待,即刻可以配浓缩胶。
本产品适用于SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备(SDS-PAGE凝胶),并适用于Tris-甘氨酸电泳体系。
1.分离胶浓度选择:根据实验目的(蛋白分子量大小或分离范围)选择合适浓度的凝胶。
2.分离胶取用量:取同等体积的分离胶与分离胶缓冲液,混匀。各试剂的取用量参考下表。
注:请准确取量,依据参考表已经计算了一定冗余量,灌胶请依据胶的要求灌制,不要依据取用量灌制。
3.浓缩胶取用量:取同等体积的浓缩胶与浓缩胶缓冲液,混匀。各试剂的取用量参考下表。
注:a.请准确取量,依据参考表已经计算了一定冗余量,灌胶请依据胶的要求灌制,不要依据取用量灌制。
b.由于浓缩胶含有染料,可能出现沉降现象,使用前请轻柔摇匀。
4.分离胶加入促凝剂:依据分离胶配制需要,取适量的促凝剂加入到分离胶中,混匀。促凝剂的取用量参考下表。
注:加入促凝剂,混匀时,需轻柔摇晃即可,避免混入空气,抑制凝胶聚合。
5.浓缩胶加入促凝剂:依据浓缩胶配制需要,取适量的促凝剂加入到浓缩胶中,混匀。促凝剂的取用量参考下表。
注:加入促凝剂,混匀时,需轻柔摇晃即可,避免混入空气,抑制凝胶聚合。
6.制胶(灌注胶液):先将分离胶灌入制胶模(玻璃板或镀层塑料胶板),留下浓缩胶灌注高度(约1.5cm),随后灌满浓缩胶,稍等片刻插入电泳齿梳。
提示:为了确保浓缩胶与分离胶界面平整,需要注意几个操作细节:①灌好分离胶后,可以轻轻左右提一下制胶模块,使分离胶界面水平;②放平制胶模块,立即灌入浓缩胶,可以左右移动缓慢灌注,避免冲坏分离胶界面,灌满即可;③此时可以稍等片刻,看分离胶与浓缩胶界面是否平整、清晰,界面平整时就可以插入梳子。
7.凝胶固化:待整块凝胶凝固(15-30分钟)拔去梳子,即可用于蛋白电泳。
| 浓缩胶配制 | |||
| 凝胶厚度 | 浓缩胶溶液 | 浓缩胶缓冲液 | 促凝剂 |
| 0.75mm | 0.5ml | 0.5ml | 10ul |
| 1.0mm | 0.75ml | 0.75ml | 15ul |
| 1.5mm | 1.0ml | 1.0ml | 20ul |
| 分离胶配制 | |||
| 凝胶厚度 | 分离胶溶液 | 分离胶缓冲液 | 促凝剂 |
| 0.75mm | 2.0ml | 2.0ml | 40ul |
| 1.0mm | 2.7ml | 2.7ml | 60ul |
| 1.5mm | 4.0ml | 4.0ml | 80ul |
组 分 | 规 格 | 说明 |
浓缩胶溶液(2×) | 80 ml | 每套试剂盒可以制备凝胶数大致如下: |
浓缩胶缓冲液(2×) | 80 ml | |
分离胶溶液(2×) | 250 ml | |
分离胶缓冲液(2×) | 250 ml | |
促凝剂 | 8 ml |
| 货号 | SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| A10106 | 6%分离胶 | 50-150kDa |
| A10108 | 8%分离胶 | 30-90kDa |
| A10110 | 10%分离胶 | 20-80kDa |
| A10112 | 12%分离胶 | 12-60kDa |
| A10115 | 15%分离胶 | 10-40kDa |
1.本产品浓缩胶含有染料,电泳时染料不迁移,不影响蛋白质的正常电泳。由于胶凝缓冲液静置时间久了,可能会出现沉降现象,不影响正常使用,请在使用前轻柔摇动混匀。
2.本产品含有Acr-Bis的化学成分,未聚合前有毒性,操作时要特别小心,要有效防护避免直接接触人体或通过呼吸进入体内。
3.凝胶的聚合速度(凝固)与温度有关,温度高凝固速度快,温度低凝固速度慢。在使用促凝剂时,可根据个人实验经验与习惯调整促凝剂加入量。
4.在配制凝胶前,制胶的各种溶液放置室温下升温,自然条件下液体平衡至室温。
5.本产品仅供专业人员科研使用,初学者请咨询专业人员或在专业人员指导下使用。
6.为了您的安全和健康,请穿好实验服,戴上一次性手套操作。
本产品应避光保存于2-8℃,有效期为一年。常温运输。
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